O que é um micrótomo e porque precisa de um


Fun fact

O primeiro micrótomo adequado para seccionar tecidos animais foi construído em 1848, com o popular Cambridge Rocker (1885), Minot (1886), e microtomos de trenó (1910) fabricados mais tarde. A cera de parafina para infiltração e apoio durante o corte foi introduzida em meados do século XIX. Foram investigados diferentes produtos químicos de laboratório para utilização como fixadores. Formalina, utilizada hoje, foi utilizada pela primeira vez em 1893.

microtome

Na rotina diária dentro de um laboratório, substâncias microscópicas e espécimes são muito comuns. Na maioria das vezes, é necessário cortar algumas das amostras em fatias extremamente finas de material, conhecidas como secções. Para preparar uma amostra e fazer esses tipos de cortes, é necessário ter um microtoma, um dispositivo muito essencial no campo da microscopia. A utilização da série de microtomos permite a preparação de amostras para observação sob luz transmitida ou radiação electrónica.

Microtomia é um método para a preparação de secções finas para materiais como ossos, minerais e dentes, e uma alternativa ao polimento eléctrico e à moagem iónica. As secções do micrótomo podem ser feitas suficientemente finas para cortar um cabelo humano na sua largura.

Entre as aplicações do micrótomo, existe a técnica tradicional da Histologia, onde os tecidos são endurecidos através da substituição da água por parafina. Além disso, pode ser encontrado na secção congelada, procedimento em que tecidos ricos em água são endurecidos por congelação e cortados em estado congelado com um microtoma congelante ou microtomo-cryostat. Além disso, existe a técnica da Microscopia Electrónica. Por outro lado, existe a técnica da microtomia botânica, onde materiais duros como madeira, osso e couro requerem um microtoma de marreta. Além disso, há espectroscopia e microscopia de fluorescência.

Antes de comprar um conjunto de microtomos, deve familiarizar-se com as suas partes principais. Primeiro, existe a placa base ou palco do microtoma, onde os carris fixam a lâmina. Em segundo lugar, existe a base do porta-lâmina. Depois, há o porta-facas. Depois, há o grampo de cassete ou suporte de blocos, que mantém o bloco de parafina no lugar. Além disso, existe o volante grosseiro e finalmente existe a configuração micron.

O microtome rotativo é o mais comum

É utilizado para cortar blocos de parafina incorporados. Além disso, pode ser utilizado para secções congeladas do criostato e em casos com resinas embutidas, por exemplo, biópsias renais LR embutidas com resina branca e medulas embutidas em metacrilato de metilo (MMA). O seccionamento é produzido pelo movimento da cabeça do micrótomo contendo um bloco através da lâmina.

O micrótomo vibrante utiliza uma lâmina vibrante, o que facilita o corte da amostra. Este microtoma utiliza menos pressão do que seria necessário com uma lâmina estacionária e é frequentemente utilizado para amostras biológicas difíceis, tais como tecidos nervosos, cérebro e medula espinal. A estabilidade do instrumento reduz as forças mecânicas na amostra de tecido para assegurar a retenção de células viáveis de alta qualidade.

Cryostat microtomes são micrótomos rotativos que cortam amostras (criosseção) que foram congeladas numa câmara de azoto líquido. A redução da temperatura dentro desta câmara aumenta a dureza da amostra, permitindo a preparação de secções com uma espessura muito específica. Finalmente, os ultra microtomos são comuns na preparação de amostras com secções extremamente finas. Normalmente, estas secções muito finas são utilizadas com microscopia electrónica de transmissão (TEM), microscopia electrónica de varrimento facial em série (SBFSEM), e microscopia óptica leve.

Quando um micrótomo é utilizado para corte de secções, as secções são de espessura uniforme. Podem ser obtidos em qualquer espessura desejada (10 ou 15 ou 20 n, etc.). As secções não são oblíquas. O tecido inteiro pode ser retido em secções, o que é particularmente necessário para o estudo do desenvolvimento de um órgão vegetal. No entanto, a secção dos microtomos é um processo longo e laborioso. Nas secções de mão livre, a espessura da secção não pode ser regulada; pode ser espessa ou fina, assim como oblíqua. Além disso, não se pode obter todo o material nas secções, pois os defeituosos devem ser descartados.

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