Qu’est-ce qu’un microtome et pourquoi en avez-vous besoin


Fun fact

Le premier microtome adapté à la section de tissus animaux a été construit en 1848, les populaires microtomes Cambridge Rocker (1885), Minot (1886) et traîneau (1910) ayant été fabriqués plus tard. La cire de paraffine pour l’infiltration et le soutien pendant la coupe a été introduite au milieu des années 1800. Différents produits chimiques de laboratoire ont été étudiés pour être utilisés comme fixateurs. La formaline, utilisée aujourd’hui, a été utilisée pour la première fois en 1893.

microtome

Dans le quotidien au sein d’un laboratoire, les substances et les spécimens microscopiques sont très courants. La plupart du temps, il est nécessaire de découper certains des échantillons en tranches extrêmement fines de matériau, appelées sections. Pour préparer un échantillon et effectuer ce type de coupes, vous devez disposer d’un microtome, un appareil indispensable dans le domaine de la microscopie. L’utilisation de la série de microtomes permet de préparer des échantillons pour une observation sous lumière transmise ou sous rayonnement électronique.

La microtomie est une méthode de préparation de sections minces pour des matériaux tels que les os, les minéraux et les dents, et une alternative à l’électropolissage et au fraisage ionique. Les sections de microtome peuvent être rendues assez fines pour couper un cheveu humain dans sa largeur.

Parmi les applications du microtome, il y a la technique traditionnelle d’Histologie, où les tissus sont durcis en remplaçant l’eau par de la paraffine. De plus, on le retrouve dans la coupe congelée, procédure où les tissus riches en eau sont durcis par congélation et coupés à l’état congelé avec un microtome de congélation ou un microtome-cryostat. En outre, il existe la technique de la microscopie électronique. D’autre part, il y a la technique de la microtomie botanique, où les matériaux durs comme le bois, l’os et le cuir nécessitent un microtome à traîneau. À cela s’ajoutent la spectroscopie et la microscopie à fluorescence.

Avant d’acheter un réseau microtome, vous devez vous familiariser avec ses principales parties. Tout d’abord, il y a la plaque de base ou la platine du microtome, où les rails fixent la lame. Deuxièmement, il y a la base du porte-lame. Ensuite, il y a le porte-couteau. Ensuite, il y a la pince à cassette ou le porte-bloc, qui maintient le bloc de paraffine en place. On trouve également le volant grossier et enfin le réglage en microns.

Le microtome rotatif est le plus courant

Il est utilisé pour la découpe de blocs de paraffine incorporés. En outre, il peut être utilisé pour les coupes congelées au cryostat et dans les cas où des résines sont incorporées, par exemple les biopsies rénales, les tissus LR incorporés dans une résine blanche et les moelles incorporées dans du méthacrylate de méthyle (MMA). La section est produite par le mouvement de la tête du microtome contenant un bloc à travers la lame.

Le microtome vibrant utilise une lame vibrante, qui facilite la coupe du spécimen. Ce microtome utilise moins de pression qu’avec une lame fixe et est souvent utilisé pour les échantillons biologiques difficiles, tels que les tissus nerveux, le cerveau et la moelle épinière. La stabilité de l’instrument réduit les forces mécaniques sur l’échantillon de tissu pour assurer la rétention de cellules viables de haute qualité.

Les microtomes à cryostat sont des microtomes rotatifs qui coupent des échantillons (cryosectionnement) qui ont été congelés dans une chambre d’azote liquide. La réduction de la température à l’intérieur de cette chambre augmente la dureté de l’échantillon, permettant la préparation de sections d’une épaisseur très spécifique. Enfin, les ultra microtomes sont courants pour préparer des échantillons avec des sections extrêmement fines. Généralement, ces sections très fines sont utilisées avec la microscopie électronique à transmission (TEM), la microscopie électronique à balayage à face série (SBFSEM) et la microscopie optique légère.

Lorsqu’un microtome est utilisé pour la coupe des sections, celles-ci sont d’épaisseur uniforme. Ils peuvent être obtenus à l’épaisseur souhaitée (10 ou 15 ou 20 n, etc.). Les sections ne sont pas obliques. Le tissu entier peut être conservé en sections, ce qui est particulièrement nécessaire pour étudier le développement d’un organe végétal. Cependant, le sectionnement des microtomes est un processus long et laborieux. Dans les sections à main levée, l’épaisseur de la section ne peut être réglée ; elle peut être épaisse ou fine, ainsi qu’oblique. En outre, vous ne pouvez pas obtenir tout le matériel dans les sections, car celles qui sont défectueuses doivent être jetées.

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